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彎曲菌的ISO解讀

更新時(shí)間:2019-06-26  |  點(diǎn)擊率:1640

彎曲菌是一種常見的導(dǎo)致人類腸炎的致病菌,以腹瀉為主要特征,并可從糞便中分離出來(lái)。它污染食物和水,夏季是傳染高峰。

彎曲菌為革蘭陰性,螺旋形彎曲,有動(dòng)力;培養(yǎng)時(shí)需3~15%氧,為微需氧菌;氧化酶陽(yáng)性,還可還原性硝酸鹽。ISO于2017年發(fā)布了新版的ISO10272-1:2017標(biāo)準(zhǔn),即《食品鏈的微生物學(xué),彎曲菌屬檢測(cè)和計(jì)數(shù)的水平方法》,它取代的是舊版ISO 10272-1:2006。具體改變主要是:
 

1. 包括了二次增菌肉湯(Preston肉湯),主要為了克服背景菌對(duì)第三代-內(nèi)酰胺類抗生素如頭孢哌酮的耐藥;
 

2. 增加了直接在mCCDA上的接種步驟;
 

3. 驗(yàn)證試驗(yàn)刪掉了微需氧生長(zhǎng),只規(guī)定了25℃需氧生長(zhǎng);
 

該ISO適用于食品、飼料和環(huán)境樣品。
 

ISO10272-1:2017建議的彎曲菌檢測(cè)方案,依據(jù)樣本類型和檢測(cè)目的,分為三種:1)在彎曲菌多的時(shí)候,不需要增菌,用方案C;2)對(duì)于彎曲菌和背景菌都較少的情況,用方案A,例如烹制過(guò)的或低溫食品。取樣后再Bolton肉湯微需氧37℃先培養(yǎng)4-6h,再41.5℃培養(yǎng)44h±4h;3)對(duì)于彎曲菌少,背景菌多的情況,例如生肉、生乳,采用方案B,在Preston肉湯中微需氧41.5℃培養(yǎng)24h±2h。
 

增菌后,方案A是采用mCCD瓊脂和另一款其選擇劑不同于mCCD的彎曲菌選擇分離培養(yǎng)基來(lái)分離,方案B是采用mCCD瓊脂來(lái)分離。均為微需氧41.5℃培養(yǎng)44h±4h。在mCCD瓊脂上彎曲菌典型菌落為灰色。對(duì)于ISO10272-1:2017中方案A所提到的另一款其選擇劑不同于mCCD的彎曲菌選擇分離培養(yǎng)基,可選擇HiMedia公司生產(chǎn)的HiCrome彎曲菌顯色培養(yǎng)基(貨號(hào)M2020,配合彎曲菌選擇性添加劑(貨號(hào)FD178)一起使用)。該顯色培養(yǎng)基含有復(fù)合蛋白胨、氯化鈉、多種顯色劑、生長(zhǎng)因子和瓊脂。適用于食品樣本和臨床樣本。培養(yǎng)基配好為在平皿中為黃色透明至輕微不透明凝膠。35-37℃孵育24-48小時(shí)后,彎曲菌菌落為淡紫色(下圖),而金葡菌和大腸埃希菌均被抑制。

 

圖片1.png

HiMedia公司是微生物產(chǎn)品生產(chǎn)商,一直致力于微生物培養(yǎng)基和細(xì)胞培養(yǎng)基的研發(fā)和生產(chǎn),具有WHO GMP認(rèn)證、ISO9001:2008,ISO13485:2003認(rèn)證,CE認(rèn)證和FDA注冊(cè)登記。其產(chǎn)品行銷140多個(gè)國(guó)家。
 

締一生物作為HiMedia公司在中國(guó)的代理商,在微生物培養(yǎng)和檢測(cè)領(lǐng)域,一如既往地為您帶來(lái)的服務(wù)。

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