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細(xì)胞狀態(tài)不好,你排除過(guò)支原體嗎?

更新時(shí)間:2020-07-16  |  點(diǎn)擊率:795

當(dāng)我們?cè)陴B(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候,有可能會(huì)出現(xiàn)如下的狀況:

 

  • 細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢

  • 細(xì)胞變形

  • 碎片增加

  • 懸浮細(xì)胞容易成團(tuán)

  • 培養(yǎng)基提前變色

  • 鏡下發(fā)現(xiàn)有小黑點(diǎn)

 

如果排除了其他試劑選擇不當(dāng)、細(xì)胞株老化、細(xì)菌污染……原因,而仍有上述一種或幾種情況,則高度提示:細(xì)胞可能出現(xiàn)了支原體污染。據(jù)報(bào)道,細(xì)胞培養(yǎng)中發(fā)生支原體污染的機(jī)率較高,會(huì)達(dá)到70%左右,常規(guī)抗生素的使用對(duì)支原體幾乎無(wú)效。

 

那么,支原體污染,對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)有什么危害呢?

 

支原體穿透真核細(xì)胞表面      大量支原體聚集在真核細(xì)胞表面(掃描電鏡照片)

 

細(xì)胞被支原體污染,解決方案

方法一:確認(rèn)細(xì)胞已被支原體污染,終止試驗(yàn),丟棄所有被污染的細(xì)胞和耗材。

   重新復(fù)蘇細(xì)胞,注意選用未被污染的細(xì)胞株、血清和培養(yǎng)基,并規(guī)范操作。

方法二:對(duì)于珍貴的,樣品不可再得的細(xì)胞,或價(jià)格昂貴的種子細(xì)胞,不但無(wú)法丟棄,而且作為種子細(xì)胞,還需要**支原體污染。

  此時(shí),需選用特異性的支原體殺除劑,清除污染,保護(hù)細(xì)胞。

 目前世界上效的方法是是德國(guó)的一款生物試劑,由Minerva公司生產(chǎn),品名Mynox®。

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