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通過CaMKII的結(jié)構(gòu)功能而非酶功能誘導(dǎo)LTP,德國MB試劑助力科研

更新時(shí)間:2023-09-01  |  點(diǎn)擊率:445

分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)往往需要用到qPCR技術(shù)。實(shí)驗(yàn)室中需要對(duì)qPCR儀器進(jìn)行校準(zhǔn),以確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確與穩(wěn)定。德國MB公司生產(chǎn)的qPCR Cycle Check試劑盒,適用于科研實(shí)驗(yàn)室和工業(yè)質(zhì)控實(shí)驗(yàn)室,適用于科研實(shí)驗(yàn)室和工業(yè)質(zhì)控實(shí)驗(yàn)室,專為驗(yàn)證qPCR儀而設(shè)計(jì),以保證儀器的安裝合格(IQ)、運(yùn)行合格(OQ)和性能合格 (PQ)。

 

海馬區(qū)的長時(shí)程增強(qiáng)(LTP)可通過兩種不同類型的機(jī)制不同的抑制劑,通過敲除大腦中主要的CaMKIIα亞型,通過阻止ATP結(jié)合的突變,或通過阻止T286自磷酸化(pT286)T286A突變(pT286),產(chǎn)生Ca2+獨(dú)立的自主"CaMKII激酶活性,來損害鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶II (CaMKII)的藥理學(xué)抑制。然而,所有這些具有CaMKII酶活性的ltp抑制干預(yù)也會(huì)干擾CaMKIInmda型谷氨酸受體亞基GluN2B的結(jié)合。

 

(1)鈣調(diào)素競爭抑制劑,如KN93KN62,可阻止誘導(dǎo)活性和GluN2B結(jié)合的刺激;

(2)肽抑制劑tatCN21tatCN19o、AIPAC3-I結(jié)合CaMKII T位點(diǎn),CaMKII T位點(diǎn)也是GluN2B的結(jié)合位點(diǎn);

(3) K42MK42R突變體阻止核苷酸與CaMKII結(jié)合,這不僅是活性的要求,也是GluN2B有效結(jié)合的要求;

(4)盡管T286A突變不能阻斷CaMKIIGluN2B的結(jié)合,但它會(huì)顯著損害細(xì)胞內(nèi)刺激誘導(dǎo)的CaMKIIGluN2B的結(jié)合以及由此導(dǎo)致的神經(jīng)元突觸CaMKII積累。

 

因此,研究人員開始確定CaMKII酶活性與GluN2B結(jié)合在LTP誘導(dǎo)中的相對(duì)貢獻(xiàn)。

 

科研人員并利用互補(bǔ)的新光/藥物遺傳學(xué)工具集來區(qū)分酶和結(jié)構(gòu)CaMKII功能。一些獨(dú)立的證據(jù)表明,LTP是由CaMKII的結(jié)構(gòu)功能而不是其酶活性誘導(dǎo)的。激酶活性的貢獻(xiàn)是通過T286自磷酸化對(duì)這種結(jié)構(gòu)作用的自調(diào)節(jié),這解釋了為什么這種區(qū)別幾十年來一直難以捉摸。即使在酶促CaMKII活性被阻斷的情況下,以繞過T286作用的方式直接啟動(dòng)結(jié)構(gòu)功能足以引發(fā)穩(wěn)健的LTP


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