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如何預防細胞培養(yǎng)體系發(fā)生真菌污染?

更新時間:2024-08-04  |  點擊率:497

真菌污染會嚴重影響細胞代謝、生長和活力,并降低轉染效率,從而影響結果的可重復性。

真菌污染的主要來源是通過空氣傳播途徑、非無菌設備和試劑,或不良的無菌技術。真菌主要以懸浮液的形式在培養(yǎng)基中生長,但也可以附著在細胞或生長血管上。在顯微鏡下,它們可以被識別為培養(yǎng)基表面的小孤立菌落,并通過延長生長導致培養(yǎng)基渾濁。在污染的晚期階段,真菌可能會增加細胞培養(yǎng)基的 pH 值,導致含酚紅的培養(yǎng)基看起來色調較淺。

 

真菌污染的具體表現:

培養(yǎng)液變化:培養(yǎng)細胞受真菌污染后,培養(yǎng)液中可能會漂浮著白色或淺黃色的小點,有的呈散在生長。這些真菌污染在初期可能不會引起培養(yǎng)液的明顯混濁,但隨著時間推移,污染可能逐漸加重。

鏡下觀察:在倒置顯微鏡下,可以觀察到絲狀、管狀或樹枝狀的菌絲縱橫交錯在細胞之間或培養(yǎng)基中,有的呈鏈狀排列。對于念珠菌和酵母菌等真菌,它們可能呈卵圓形態(tài),散在于細胞周邊和細胞之間生長。

 

一般遇到細胞被真菌污染的情況,我們建議直接將細胞丟棄,并對培養(yǎng)環(huán)境進行清潔消毒。如果遇到真菌污染早期,且不能隨意丟棄細胞的情況,建議使用細胞專用的真菌清除試劑,例如:德國MB公司生產的 Funox®,該真菌祛除試劑并專門設計用于預防并清除真菌感染。它由納他霉素組成,納他霉素是一種由納塔氏鏈霉菌生產的多烯抗真菌抗生素。納他霉素的抗真菌活性取決于它們與各種真菌的細胞膜甾醇的結合。

 

Funox®優(yōu)勢:

1、特異性強

Funox® 是一種用于培養(yǎng)基的添加劑,其中含有納他霉素,納他霉素是一種天然存在的抗菌劑,可保護細胞培養(yǎng)物免受各種常見真菌和酵母污染物的侵害。

 

2、應用范圍廣

Funox® 可用于長期用于細胞培養(yǎng),也可用于預防新鮮制備的原代細胞培養(yǎng)物中的污染。

 

3、無細胞毒性

到目前為止,按照說明書使用該產品,尚未報告對各種細胞系的細胞毒性作用。

 

4、簡單易用

Funox® 可以直接添加到細胞培養(yǎng)物的大多數燒瓶或板中,優(yōu)選在更換培養(yǎng)基時或傳代細胞后

 

5、穩(wěn)定性

Funox®應在37°C孵育7天后換新,以達到最大的保護。

 

6、推薦用途

Funox® 適用于研究和工業(yè)中,用于細胞培養(yǎng)物和生物制品的直接測試。不建議用于臨床診斷。需要注意的是,我們建議在污染晚期階段的情況下丟棄細胞培養(yǎng)物。

 


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