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如何選擇用于實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)檢測(cè)的支原體qPCR標(biāo)準(zhǔn)品

更新時(shí)間:2024-08-16  |  點(diǎn)擊率:290

在實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)過程中,支原體污染是一個(gè)常見的問題,它不僅會(huì)影響細(xì)胞的生長(zhǎng)和性能,還可能對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生重大影響。因此,對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行準(zhǔn)確的支原體檢測(cè)至關(guān)重要。而定量PCRqPCR)技術(shù)因其高靈敏度和高特異性,已成為支原體檢測(cè)的方法。選擇合適的支原體qPCR標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)于確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性尤為重要。

一、了解qPCR標(biāo)準(zhǔn)品的基本概念

qPCR標(biāo)準(zhǔn)品通常包含選定物種的定量基因組DNA,用于生成標(biāo)準(zhǔn)曲線,幫助確定未知樣品中的DNA濃度。在支原體檢測(cè)中,qPCR標(biāo)準(zhǔn)品通常是特定支原體的基因組DNA,經(jīng)過精確量化和處理,以便在實(shí)驗(yàn)中作為參考。

二、選擇qPCR標(biāo)準(zhǔn)品的關(guān)鍵因素

1. 準(zhǔn)確性與特異性

準(zhǔn)確性是選擇qPCR標(biāo)準(zhǔn)品的首要考慮因素。標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)包含準(zhǔn)確的支原體基因組DNA,能夠代表目標(biāo)支原體的全部遺傳信息。同時(shí),特異性也非常重要,標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)只包含目標(biāo)支原體的DNA,避免與其他微生物的DNA發(fā)生交叉反應(yīng)。

2. 靈敏度

高靈敏度的qPCR標(biāo)準(zhǔn)品能夠檢測(cè)到極低濃度的支原體DNA,這對(duì)于早期發(fā)現(xiàn)污染至關(guān)重要。例如,德國(guó)MB公司的支原體qPCR檢測(cè)試劑盒經(jīng)典法檢測(cè)限可達(dá)到≤10CFU/ml,能夠滿足大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室的需求。

3. 操作簡(jiǎn)便性

易于操作的標(biāo)準(zhǔn)品能夠減少實(shí)驗(yàn)人員的操作錯(cuò)誤,提高實(shí)驗(yàn)效率。例如,一些預(yù)分裝或已加內(nèi)控對(duì)照的qPCR標(biāo)準(zhǔn)品能夠大大簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)步驟,減少污染風(fēng)險(xiǎn)。

4. 適用性

選擇的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)適用于多種基于qPCR的應(yīng)用,包括擴(kuò)增、敏感性和特異性控制等。此外,還應(yīng)考慮標(biāo)準(zhǔn)品是否與實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的qPCR儀器和試劑兼容。

5. 符合藥典要求

對(duì)于涉及臨床應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)室,選擇的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)符合國(guó)際或國(guó)內(nèi)《藥典》的要求。例如,歐洲藥典和日本藥典對(duì)NAT法(核酸擴(kuò)增檢測(cè))的檢測(cè)靈敏度有明確要求,需要達(dá)到10CFU/ml

三、推薦產(chǎn)品示例

德國(guó)MB支原體qPCR標(biāo)準(zhǔn)品

德國(guó)MB公司是支原體檢測(cè)領(lǐng)域的企業(yè),其生產(chǎn)的支原體qPCR標(biāo)準(zhǔn)品具有以下特點(diǎn):

  • 高特異性:一次檢測(cè)即可涵蓋所有可能感染細(xì)胞的支原體物種,根據(jù)序列一致性,至少可以檢測(cè)到107種支原體物種。

  • 高靈敏度:檢測(cè)限可達(dá)到≤10CFU/ml,滿足大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室的需求。

  • 操作簡(jiǎn)便:提供預(yù)分裝或已加內(nèi)控對(duì)照的標(biāo)準(zhǔn)品,減少實(shí)驗(yàn)步驟和污染風(fēng)險(xiǎn)。

  • 符合藥典要求:經(jīng)過方法驗(yàn)證,符合國(guó)際或國(guó)內(nèi)《藥典》的要求。

配套試劑盒與標(biāo)準(zhǔn)品

為了獲得更準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果,建議選擇與qPCR標(biāo)準(zhǔn)品相配套的試劑盒進(jìn)行檢測(cè)。例如,德國(guó)MB公司的Venor®Gem qEP試劑盒,可與絕大多數(shù)能夠檢測(cè)熒光染料FAMHEX的實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀結(jié)合使用,進(jìn)一步提高了檢測(cè)的準(zhǔn)確性和可靠性。

四、結(jié)論

選擇合適的支原體qPCR標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)于確保實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)檢測(cè)的準(zhǔn)確性和可靠性至關(guān)重要。在選擇過程中,應(yīng)綜合考慮準(zhǔn)確性、特異性、靈敏度、操作簡(jiǎn)便性和適用性等因素。同時(shí),建議選擇經(jīng)過市場(chǎng)考驗(yàn)、符合國(guó)際或國(guó)內(nèi)《藥典》要求的品牌產(chǎn)品,如德國(guó)MB公司的支原體qPCR標(biāo)準(zhǔn)品及其配套試劑盒。通過這些措施,可以最大限度地減少支原體污染對(duì)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)的影響,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

 


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