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細(xì)胞分離液的作用及實驗步驟

更新時間:2019-10-17  |  點擊率:1391
   細(xì)胞分離液的作用及實驗步驟
  細(xì)胞分離液使用說明:
  細(xì)胞分離液是通過運用除去血液中的纖維蛋白或抗凝血劑處理人體血液;這種改良對于其他物種來源血液或者其他組織非常有必要。
  1.輕輕顛倒瓶子使LSM充分混合
  2.無菌轉(zhuǎn)移3mlLSM到15ml離心管中。
  3.混合2ml除纖維蛋白血液或肝素處理血液和2ml生理鹽水
  4.仔細(xì)的將稀釋血液加入3mlLSM(室溫)于15ml離心管中,在血液和LSM中形成一個明顯的分層。不要將稀釋血液混合入LSM中。
  5.室溫下400g離心15-30分鐘,離心可以沉淀紅細(xì)胞和多核白細(xì)胞同時可以再LSM上形成一層單核淋巴細(xì)胞,如上圖所示。
  6.吸出淋巴細(xì)胞上方2-3mm的血漿。
  7.吸取淋巴細(xì)胞層以及它下面一半的LSM和轉(zhuǎn)移到另外的一個離心管。加入等體積的平衡鹽緩沖液至淋巴細(xì)胞離心管中,室溫離心10分鐘,離心速度設(shè)定在既不損傷細(xì)胞又能沉淀細(xì)胞即刻,例如160-260xg(去除LSM和降低血小板的百分比)。
  8.用平衡鹽緩沖液清洗細(xì)胞,用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基重懸細(xì)胞。
  以上便是今天關(guān)于細(xì)胞分離液的作用及實驗步驟的全部分享了,希望對大家今后使用本設(shè)備能有幫助。
 
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