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關于Biocoll細胞分離液的正確打開方式

更新時間:2021-09-10  |  點擊率:1023
   Biocoll細胞分離液用于形成連續(xù)或者不連續(xù)梯度。生物學友好:低滲性,無毒性,無菌級,保證*的細胞活性和完整的形態(tài),同時分離液處理不會影響下游工藝。
  當顆粒懸浮液被離心后,沉降速度和離心力是成比例的。溶液的物理性質也會影響沉降速率。在一個固定的離心力和液體粘度下,沉降速率和顆粒大小以及其自身密度和周圍介質的密度差相關。
  Biocoll細胞分離液的配置與使用方法是什么呢?
  1、不同濃度(密度)分離液的制備: 先用9份分離液與1份8.5% NaCl混合達到生理性滲透壓,然后用生理溶液(0.85% NaCl)稀釋到所需濃度。
  2、不連續(xù)密度梯度分離液層的制備: 先將試管壁用牛血清濕潤,除去多余血清,這種預處理可使逐層疊加的分離液平穩(wěn)沿管壁流下,使形成滿意的界面。在制備過程中一般用長針頭注射器從高密度向低密度逐層放置,有時相鄰兩層分離液比重相差不大時,可將分離液放入注射器中,小針頭斜面緊貼管壁,任其自然慢慢流下。
  3、裝樣:樣品體積和細胞濃度根據(jù)不同細胞而異,一般加樣體積不宜過大,細胞濃度也不可過高,否則會影響細胞的分離和回收。
  4、離心:一般采用離心力為400g,時間20~25min。由于多層分離液之間密度差別不大,因此離心機加速、降速時要慢,要平穩(wěn)。
  5、取樣:當所要分離的細胞絕大部分在兩層的界面時,可逐層去除分離液后收集界面部位的細胞;有時大部分細胞位于分離液層中,則需要逐層收集。收獲含有分離液的細胞經2次洗滌后可供培養(yǎng)或檢測用。
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