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支原體DNA抽提Kit被污染后有哪些表現(xiàn)

更新時間:2022-10-26  |  點擊率:820
支原體DNA抽提Kit特點及操作步驟  
特點  
1.符合歐洲藥典的要求。  
2.從細胞上清和生物制品中,均可分離支原體DNA,全程只需30分鐘。  
3.洗脫DNA純度高,體積50μl,保證PCR最大的靈敏。  
細胞被支原體污染后的表現(xiàn)  
①細胞生長緩慢  
②細胞變形  
③培養(yǎng)基中碎片增加  
④細胞易聚團  
⑤鏡下觀察有小黑點  
⑥培養(yǎng)基提前變色  
操作步驟  
試劑盒組分  
Spin columns(核酸純化?。ollection tubes(收集管)、Conditioner液、Binding Buffer E液、Buffer A1液、Buffer A2液、Buffer E液
該試劑盒的設(shè)計滿足歐洲藥典和日本藥典對于不同類型樣本(如軟骨細胞、血清、細胞培養(yǎng)上清)在DNA抽提后的檢測標準。可直接檢測細胞上清(研究領(lǐng)域),或者先對細胞培養(yǎng)物富集,或先抽提DNA。該試劑盒完全符合EP2.6.7和JP G3的要求。
檢測原理:
該試劑盒擴增柔膜體對應(yīng)的16S rRNA上的特異序列, 而真核細胞和其他細菌DNA不會被擴增。
試劑盒說明書同時包括細胞培養(yǎng)上清篩查和遵循歐洲藥典和日本藥典檢查的流程,包括對DNA抽提和對樣本體積的規(guī)定。整個檢測小于3小時。并且與ELISA、熒光染色和培養(yǎng)法不同的是,無須活支原體。和一些生化和細胞學(xué)方法相比,PCR具有更高的靈敏度和準確性。
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